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石榴石,格桑花-成长、价值、趋势之辩,投资的本质和误区

2019-07-07 08:41:39 投稿作者:admin 围观人数:138 评论人数:0次

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通报菌:

应同学要求,现把选修三内容总结一下,期望我们喜爱。






5.1 基因工程和细胞工程


常识体系






中心提炼


1
基因工程3种操作东西的效果与特色




项目

约束酶

DNA衔接酶

载体

效果

切开意图基因和载体

拼接DNA片段,构成重组DNA分子

带着意图基因进入受体细胞

效果

部位

两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间构成的磷酸二酯键


效果特

点(条件)

①辨认特定的核苷酸序列;

②在特定位点上切开DNA分子

①EcoliDNA衔接酶只能衔接黏性结尾;

②T4DNA衔接酶能衔接黏性结尾平和结尾

①能在宿主细胞内安稳存在并很多仿制;

②有一个至多个约束酶切开位点;

③具有特别的符号基因

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2
掌握获取意图基因的3种途径




(1)直接别离:

从天然界已有的物种中别离,如从基因文库中获取。

(2)人工组成意图基因(常用办法如下)

①化学组成法:已知核苷酸序列的较小基因,直接运用DNA组成仪用化学办法组成,不需求模板。

②人工组成法:以RNA为模板,在反转录酶的效果下人工组成。

(3)运用PCR技能扩增。




3
紧记基因表达载体的构建





(1)基因表达载体的组成:意图基因+发动子+停止子+符号基因+仿制原点。

(2)发动子和停止子:发动子是RNA聚合酶辨认和结合的部位,发动转录;停止子是停止转录的位点。

(3)基因表达载体的构建进程





4
将意图基因导入受体细胞




生物品种

植物细胞

动物细胞

微生物细胞

常用办法

农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法等

显微打针技能

感触态细胞法(Ca2+处理法)

受体细胞

体细胞

受精卵

原核细胞




5
理清意图基因的检测与判定




(1)导石榴石,格桑花-生长、价值、趋势之辩,出资的实质和误区入检测:DNA分子杂交技能(运用DNA探针)

(2)表达检测

(3)个别生物学水平判定:如对转基因作物进行抗虫或抗病等的接种试验。




6
重视植物安排培育的5个易错点




(1)稚嫩的安排脱分解较为简单,如茎尖、根尖、构成层细胞易脱分解,而植物的茎、叶和老练的安排则较难。

(2)脱分解构成愈伤安排的进程不需求,再分解进程需求,因为愈伤安排运用有机养分成分,而试管苗需求进行光合效果以自养。

(3)运用植物安排培育技能出产细胞产品时,有时只需将外植体培育到愈伤安排,从愈伤安排中获取产品。

(4)人工种子发育初期需求的养分物质由人工胚乳供给。

(5)植物安排培育和动物细胞培育过commit程都存在细胞的培育进程,但植物细胞能够先割裂再分解,而动物细胞不分解只割裂。



7
理清3种细胞的差异




(1)杂种细胞:植物体细胞杂交进程中,两种细胞去掉细胞壁之后构成的原生质体交融,交融的原生质体呈现细胞壁之后构成的细胞叫杂种细胞。

(2)重组细胞:细胞的细胞核移植到去核卵母细胞之后构成的细胞叫重组细胞。

(3)杂交细胞:动物细胞交融构成的细胞常称为杂交细胞。



8
4个易错点




重视植物体细胞杂交与动物细胞交融的4个易错点

(1)植物体细胞杂交与动物紫薇斗数细胞交融中酶的效果目标不同,纤维素酶和果胶酶效果于细胞壁,而胰蛋白酶等效果于细胞间的蛋白质。

(2)灭活的病毒坚持了其抗原性,但毒性消失。

(3)植物杂交细胞在激素诱导下能表达出全能性,但动物杂交细胞的全能性不能表达。

(4)克隆动物的起点是通过核移植后构成的重组细胞,其遗传物质首要来自供体,因而构成的个别性状首要同供体,但也有部分性状同受体。




9
躲避克隆与试管动物的3个误区




(1)误区一:试管动物与克隆动物的发生都是无性生殖。

纠正:试管动物的发生是有性生殖,克隆动物的发生是无性生殖。

(2)误区二:试管动物(哺乳类)的发生是在体外进行的,克隆动物(哺乳类)的发生是在体内进行的。

纠正:试管动物(哺乳类)和克隆动物(哺乳类)前期胚胎之前都是在体外进行的,前期胚胎通过胚胎移植之后是在体内进行的。

(3)误区三:胚胎移植的优势是充分发挥雌性优秀个别的繁衍潜力,因而胚胎移植的胚胎只能来自体内受精的胚胎。

纠正:胚胎移植的胚胎有三个来历:体内正常受精发生的胚胎、核移植发生的重组细胞培育而来的胚胎、体外受精发生的前期胚胎。




真题回放





1.2016江苏卷.33下表是几种约束酶辨认序列及其切开位点,图1、图2中标示了相关约束酶的酶切位点,其间切开位点相同的酶不重复标示。请答复下列问题:






1)用图中质粒和意图基因构建重组质粒,应选用______两种约束酶切开,酶切后的载体和意图基因片段,通过__________酶效果后取得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于__________________态的大肠杆菌。

2)为了挑选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在挑选平板培育基中添加__________,平板上长出的菌落,常用PCR判定,所用的引物组成为图2_____________

3)若BamH  I酶切的DNA结尾与苦刺头Bcl I酶切的DNA结尾衔接,衔接部位的6个碱基对序列为          ,关于该部位,这两种酶          (填“都能”、“都不能”或“只要一种能”)切开。

4)若用Sau3A I切图1质粒最多或许取得    种巨细不同的DNA片段。

答案

1BclⅠ和Hind   衔接   感触 

2)四环素   引物甲和引物丙

3)都不能  

47

解析

(1)依据图中质粒和意图基因的特色,质粒中四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因能够作为符号基因,至少要保存一个符号基因,所以不能够选用BamHⅠ酶或Sau3AⅠ酶(BamHⅠ酶和BclⅠ酶辨认的序列也能够被Sau3AⅠ酶辨认并切开),否则会损坏两个符号基因,再结合意图基因的结构特色,构建重组质粒时应选用BclⅠ和HindⅢ两种约束酶切开;酶切后的载体和意图基因片段所构成的缺口,通过DNA衔接酶效果后能够进行衔接,取得重组质粒。为了扩增重组质粒,能够用大肠杆菌作为受体细胞,此刻大肠杆菌需处于感触态,简单吸收周围环境中的DNA分子。

(2)用上述约束酶切开了DNA分子后,只能以四环素抗性基因作为符号基因,为了挑选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在挑选平板培育基中添加四环素。用PCR技能扩增意图基因时,依据图2中引物的特色和延伸的方向可知,所用的引物组成为图2中引物甲和引物丙。

(3)依据图中BamH Ⅰ酶和Bcl Ⅰ酶辨认的序列特色和切开位点可知,若BamHⅠ酶切的D女流NA结尾与BclⅠ酶切的DNA结尾相互衔接后,衔接部位的6个碱基对序列为:或 ;关于该部位,图中BamHⅠ酶和BclⅠ酶都无法辨认并切开,所以这两种酶都不能切开。

(4)若用Sau3AⅠ切图1质粒,依据Sau3AⅠ辨认的特色,能够在质粒的BamHⅠ酶和BclⅠ酶地点的三个位点随机切开DNA分子,若只切开图中任何1个切断,就会构成1种巨细的DNA分子;若只切开图中任何2个切断,就会构成6种巨细不同的DNA分子;若一起切开图中3个切断,所构成的3种DNA分子片段与只切开图中任何2个切断中的3种DNA片段巨细相同,所以最多或许取得7种巨细不同的DNA片段。


2.2016课标1.40)石榴石,格桑花-生长、价值、趋势之辩,出资的实质和误区某一质粒载体如图所示,外源DNA刺进到AmprTetr中会导致相应的基因失活(Ampr表明氨苄青霉素抗性基因,Tetr表明四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamHI酶切后,与用BamHI酶切取得的意图基因混合,参加DNA衔接酶进行衔接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌,成果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状意图基因、含有质粒载体、含有刺进了意图基因的重组质粒的大肠杆菌。答复下列问题:



1)质粒载体作为基因工程的东西,应具有的基本条件有______________(答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满意上述基本条件外,还需具有发动子和停止子。

2)假如用含有氨苄青霉素的培育基进行挑选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状意图基因的细胞是不能差异的,其原因是______________;而且____________________________赫章可乐火把节的细胞也是不能差异的,其原因是_____________。在上述挑选的基础上,若要挑选含有刺进了意图基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需运用含有是_____________的固体培育基。

3)基因工程中,某些噬菌体经改造后能够作为载体,其DNA仿制所需的质料来自于_____________。岳麓书院


答案

1)能够自我仿制、具有符号基因、具有一个至多个约束酶切开位点(答出两点即可)

2)二者均不含氨苄青霉素抗性基因,在该培育基上都不能生长  含有质粒载体  含有刺进了意图基因的重组质粒(或答含有重组质粒)  二者都含氨苄青霉素抗性基因,在该培育基上均能生长  四环素

3)受体细胞


解析

(1)质粒载体作为基因工程的东西,应具有的条件:有必要有一个或多个约束酶的酶切位点;有必要有自我仿制的才干;具有符号基因;有必要是安全的,不会对受体细胞构成损伤;分子巨细适宜,答恣意两点都能够。

(yinleren2)未被转化的和仅含环状意图基因的大肠杆菌因为二者均不含有氨苄青霉素抗性基因,在含有氨苄青霉素的培育基上均不生长,所以二者不能差异;含有质粒载体和含有刺进了意图基因的重组质粒(或答含有重组质粒)的大肠杆菌因为二者均含有氨苄青霉素抗性基因,在该培育基上均能生长,所以二者不能差异。若要挑选含有刺进了意图基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落,因为质粒载体运用了BamHⅠ酶切后,损坏的是四环素抗性基因,使细胞失去了四环素抗性,而质粒载体上的四环素(抗性)基因功用无缺,因而含有质粒载体的细胞能够在含四环素的培育基上生长,而含有刺进了意图基因的重组质粒的细胞不能在含四环素的培育基上生长,所以还需运用含有四环素的固体培育基。

(3)基因工程中,某些改造后的噬菌体作为载体,因为噬菌体归于病毒,没有天然生成快活人现场直播细胞结构,只要蛋白质和核酸,只能营寄生日子,所以病毒DNA的仿制质料来自受体细胞(大肠杆菌)


3.2016新课标Ⅲ卷.40图(a)中的三个DNA片段上顺次表明出了EcoR IBamH ISau3A I三种约束性内切酶的辨认序列与切开位点,图(b)为某种表达载体示意图(载体上的EcoR ISau3A I的切点是仅有的)。






依据基因工程的有关常识,答复下列问题:

1)经BamH I酶切开得到的意图基因能够与上述表达载体被____________酶切后的产品衔接,理由是____________

2)若或人运用图(b)所示的表达载体取得了甲、乙、丙三种含有意图基因的重组子,如图(c)所示。这三种重组子中,不能在宿主细胞中表达意图基因产品的有____________,不能表达的原因是____________

3DNA衔接酶是将两个DNA片段衔接起来的酶,常见的有________________________,其间既能衔接黏性结尾又能衔接平结尾的是____________


答案

1Sau3A    两种梅切开后发生的片段具有相同的黏性结尾

2)甲和丙     甲中意图基因刺进在发动子的上游, 丙中意图基因刺进在停止子的下流,两者意图基因均不能转录

3EcoliDNA衔接酶    T4DNA衔接酶     T4DNA衔接酶


解析

(1)HⅠ酶和Sau3AⅠ酶的辨认序列中都包含了,且在同一位点将磷酸二酯键开裂,白石麻衣然后构成相同的黏性结尾,在DNA衔接酶的效果下可互相衔接。(2)完好的基因表达载体包含发动子、意图基因、停止子和符号基因,其间发动子和停止子起转录调控效果,有必要散布于意图基因的上游和下流。(3)DNA衔接酶依据来历不同可分为两类,一类是从大肠杆菌中别离得到的,称为Ecoli DNA衔接酶,另一类是从T4噬菌体中别离得到的,称为TDNA衔接酶,Ecoli DNA衔接酶只能衔接黏性结尾,TDNA衔接酶既能衔接黏性结尾又能衔接平结尾,但衔接平结尾的功率较低。


4.2016天津卷.7(12分)人血清白蛋白(HSA) 具有重要的医用价值,只能从血浆中制备。下图是以基因工程技能获取重组HSA(rHSA)的两条途径。







(1)获取HSA基因,首要需搜集人的血液,提取_____________组成总cDNA,然后以cDNA为模板,选用PCR技能扩增HSA基因。下图中箭头表明一条引物结合模板的方位及扩增方向,请用箭头在方框内标出标出另一条引物的方位及扩增方向。






               

(2)发动子一般具有物种及安排特异性,构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体,需求挑选的发动子是_____________(填写字母,单选)。

A.人血细胞发动子   B.水稻胚乳细胞发动子  C.大肠杆菌发动子 D.农杆菌发动子

(3)运用农杆菌转化水稻受体细胞的进程中,需添加酚类物质,其意图是__________________________。

(4)人体组成的初始HSA多肽,需求通过膜体系加工构成正确的空间结构才干有活性。与途径II比较,挑选途径I获取rHSA的优势是_______________________________________。

(5)为证明rHSA具有医用价值,须承认rHSA与_________________的生物学功用共同。

答案

1)总RNA (或mRNA





2B

3)招引农杆菌移向水稻受体细胞,有利于意图基因成功转化

4)水稻是真核生物,具有膜体系,能对初始rHSA多肽进行高效加工

5HAS

解析

(1)为了获取HSA基因,可从人的血液中提取总RNA(或mRNA)反转录成总cDNA,再以cDNA为模板用PCR技能扩美人走光增。引物是一段短的单链RNA或DNA片段,一个引物与含有意图基因一端的一条DNA模板链互补,则另一个引物与含有意图基因另一端的一条DNA模板链互补,方向是相反的。

(2)构建在水稻胚乳细胞内特异性表达rHSA的载体,所选的花果山发动子有必要是能够在水稻胚乳细胞内特异性表达的基因的发动子,契合题意的是B。

(3)运用农杆菌转化水稻受体细胞的进程中,添加酚类物质,意图是招引农杆菌移向水稻受体细胞,有利于意图基因成功转化。

(4)途径Ⅰ获取rHSA能通过水稻细胞的膜体系加工,而途径Ⅱ通过大肠杆菌(原核细胞,无生物膜体系)获取,无法对初始rHSA进行加工润饰,所以途径Ⅰ的优势是水稻是真核生物,具有膜体系,能对初始rHSA多肽进行高效加工。

(5)为证明rHSA具有医用价值,须承认rHSA与HSA的生物学功用共同。


6.2016海南卷.31基因工程又称为DNA重组技能,答复相关问题:

1)在基因工程中,获取意图基因首要有两大途径,即______和从_______中别离。

2)运用某植物的老练叶片为资料,一起构建cDNA文库和基因组文库,两个文库比较,cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少,其原因是______

3)在基因表达载体中,发动子是______聚合酶辨认并结合的部位。若选用原核生物作为基因表达载体的受体细胞,最常用的原核生物是______

4)将意图基因通过基因枪法导入植物细胞时,常用的带着意图基因的金属颗粒有___________颗粒。

答案

1)人工组成   生物资料

2cDNA文库中只含有叶细胞已转录(或已表达)的基因,而基因组文库中含有该植物的悉数跑得快基因

3RNA   大肠杆菌(或答细菌)

4)金粉   钨粉

解析

(1)获取意图基因首要有两大途径,即人工组成和从天然界已有的物质中别离。

(2)植物的老练叶片中基因挑选性表达,因而由一切的RNA反转录构成的cDNA文库中含有叶细胞已转录的基因,而基因组文库中含有该植物的悉数基因。

(3)在基因表达载体中,发动子是RNA聚合酶辨认并结合的部位。选用原核生物作为基因表达载体的受体细胞,因为易于培育,最常选用大肠杆菌(或细菌)

(4)将意图基因通过基因枪法导入植物细胞时,常用的带着意图基因的金属颗粒有金粉和钨粉颗粒。


7.2016上海卷.九)答复下列有关遗传信息传递与表达的问题。

在图27所示的质粒PZHZ11(总长为3.6kb1kb=1000对碱基因)中,lacZ基因编码-半乳糖苷酶,后者催化生成的化合物能将白色的大肠杆菌染成蓝色。

(1)若先用约束酶BamHI切开pZHZ11,然后灭活BamHI酶,再加DNA衔接酶进行衔接,最终将衔接物导入满足数量的大肠杆菌细胞中,则含3.1kb质粒的细胞色彩为     ;含3.6kb质粒的细胞色彩为歌华有线                 

(2)若将两头分别用约束酶BamHIBglHI切开的单个意图基因片段置换pZHZ110.5kbBamHI酶切片段,构成4.9kb的重组质粒,则意图基董力因长度为       kb

(3)上述4.9kb的石榴石,格桑花-生长、价值、趋势之辩,出资的实质和误区重组质粒有两种方式,若用BamHIEcoRI联合酶切其间一种,只能取得1.7kb3.2kb两种DNA片段;那么联合酶切肯定双刃平等长度的另一种重组质粒,则可取得       kb       kb两种DNA片段。

(4)若将人的染色体DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并判定意图基因,然后再将取得的意图基因转入植物细胞中表达,最终将产品的药物蛋白注入小鼠体内调查其生物功用是否发挥,那么上述进程归于      

A.人类基因工程              B.动物基因工程     

C.植物基因工程              D.微生物基因工程石榴石,格桑花-生长、价值、趋势之辩,出资的实质和误区


答案

(1)白色  白色和蓝色/白色或蓝色

(2)1.8

(3迫击炮)1.4  3.5

(4)C


解析

(1)3.1 kb质粒lacZ基因被损坏,含3.1 kb质粒的细胞色彩为白色;加DNA衔接酶进行衔接,被切下的片段或许反向衔接,所含3.6 kb质粒的细胞或许含有正常质粒和反常质粒,也或许只含有正常质粒或反常质粒,色彩为白色和蓝色,或许为白色或蓝色。

(2)pZHZ110.5 kbBamHI酶切片段被切除后,剩下3.1kb,将两头分别用约束酶BamHIBglHI切开的单个意图基因刺进,构成4.9 kb的重组质粒,则意图基因巨细为4.9-3.1=1.8kb

(3)约束酶BamHIBglHI切开发生的黏性结尾能够进行衔接,但衔接后不能被两者中的任何一个辨认并切开,用BamHI切开4.9 kb的重组质粒,只要一个切开位点。用BamHIEcoRI联合酶切其间一种,只能取得1.7 kb3.2 kb两种DNA片段;联合酶切平等长度的另一种重组质粒,可取得1.7+1.8=3.5kb3.2-18=1.4kb两种DNA片段。

(石榴石,格桑花-生长、价值、趋势之辩,出资的实质和误区4)题干所述意图是让人的基因在植物细胞中表达,归于植物基因工程。




5.2 胚胎工程、生物技能的安全性和道德问题、生态工程

常识体系








中心提炼






1. 掌握胚胎工程的操作流程




(1)胚胎移植的4个定论

①胚胎移植实质上是前期胚胎在相同生理环境条件下空间方位的转化;胚胎移植的优势是充分发挥雌性优秀个别的繁衍潜能。

②胚胎移植进程中两次运用激素,第一次常用孕激素对受、供体进行同期发情处理;第2次用促性腺激素对供体做超数排卵处理。

③胚胎移植进程中的两次查看:第一次对搜集的胚胎进行查看;第2次对受体母牛是否妊娠进行查看。

④胚胎移植是有性生殖仍是无性生殖,取决于胚胎是由受精卵构成的,仍是由核移植技能构成重组细胞并发育而成或胚胎切割构成的。

(2)胚胎切割的2个留意事项

①资料挑选:挑选发育杰出、形状正常的桑椹胚或囊胚

②切割留意点:选材为囊胚时,留意将内细胞团平等切割

(3)胚胎工程中受精效果的3个要害点

①受精的标志是在通明带和卵细胞膜之间调查到两个极体

②受精完结的标志是雌、雄原核的融退烧办法合

③体外受精时,卵母细胞要培育到减数第2次割裂中期,精子需求获能。




2. 医治性和生殖性克隆的差异和联络




  类型

项目  

医治性克隆

生殖性克隆

意图

从胚胎中取出干细胞用于医学研讨和医治

用于生育,取得人的仿制品

水平

细胞水平

个别水平

联络

都归于无性生殖;发生新个别或新安排,遗传信息相同




3.试管婴儿和规划试管婴儿的异同点




(1)规划试管婴儿比试管婴儿多出的是进程

(2)试管婴儿首要是处理不孕配偶的生育问题,规划试管婴儿用于白血病、贫血症等疾病的医治。

(3)两者都是体外受精,并进行体外前期胚胎培育石榴石,格桑花-生长、价值、趋势之辩,出资的实质和误区,都要通过胚胎移植,都是有性生殖。




4.理清生态工程的原理和实例






5.清晰生态工程基本原理的判别办法




(1)着重物质循环、废物运用、减轻环境污染→物质循环再生原理。

(2)表现物种多,养分联络杂乱→生物多样性原理。

(3)着重生物与环境的和谐与平衡;触及环境承载力→和谐与平衡原理。

(4)触及天然、经济和社会;指整个别系,如林业生态工程建造→整体性原理。

(5)触及结构、功用,散布式、集中式、环式→体系的结构决议功用原理(体系学和工程学原理)。

(6)触及体系组分的比例联络、整体功用大于各部分之和,指体系内部,如互利共生→体系整体性原理(体系学和工程学原理)。




6.依据实例,确认生态工程的原理




生态工程实例

生态工程原理

无废弃物农业

遵从物质循环再生原理

在人工林中添加植被层次

遵从物种多样性原理

太湖水体富养分解引起大面积水华

违背和谐与平衡原理

前面造石榴石,格桑花-生长、价值、趋势之辩,出资的实质和误区林,后边砍树

违背整体性原理




真题回放





5.2016课标全国Ⅱ卷.40)下图表明通过核移植等技能取得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。

答复下列问题:

1)图中A表明正常细胞核,染色体数为裸睡2n,则其性染色体的组成可为____________。进程①表明去除细胞核,该进程一般要在卵母细胞培育至恰当时期再进行,去核经常选用_______的办法。②代表的进程是__________

2)通过屡次传代后,供体细胞中______的安稳性会下降,因而,选材时有必要重视传代次数。

3)若取得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的视点剖析其原因是______

4)与克隆羊“多莉(利)”培育成功相同,其他克隆坎特动物的成功取得也证明了__________

答案

1XXXY  显微操作(去核法)  胚胎移植

2)遗传物质  

3)卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的形状发生影响

4)现已分解的动物体细胞核具有全能性。

解析

(1)核移植技能中,供体能够是雌性也能够是雄性,因而,A的性染色体组成可为XX或XY;去核的办法是显微操作,将前期胚胎移入代孕个别的技能是胚胎移植。

(2)动物细胞传代培育至10~50代时,部分细胞的遗传物质(核型)或许会发生变化,因而,核移植技能中的供体细胞应为传代培育10代以内的细胞。

(3)克隆动物的遗传物质来历于两个个别,其核基因来自于供体,细胞质基因来自于受体(卵母细胞),细胞质基因也会影响克隆动物的性状。

(4)克隆动物的成功取得证明了动物已分解的体细胞的细胞核具有全能性。


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